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5'...G C T A G#C...3' 3'...C#G A T C G...5' L'enzima di restrizione BspOI riconosce i siti GCTAG^C e taglia a 37°C in 5-15 minuti usando il tampone universale FastDigest Buffer. Questo enzima è un isoschizomero di BmtI avente la stessa specificità (Isoschizomeri: AsuNHI).