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5'...C C#T N A G G...3' 3'...G G A N T#C C...5' L'enzima di restrizione Eco81I riconosce i siti CC^TNAGG e taglia a 37°C in 5-15 minuti usando il tampone universale FastDigest Buffer. Questo enzima è un isoschizomero di Bsu36I avente la stessa specificità (Isoschizomeri: AxyI, Bse21I).