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5'...G T T#A A C...3' 3'...C A A#T T G...5' L'enzima di restrizione KspAI riconosce i siti GTT^AAC e taglia a 37°C in 5-15 minuti usando il tampone universale FastDigest Buffer. Questo enzima e un isoschizomero di HpaI avente la stessa specificità (Isoschizomeri: BsaKI, BseII, BstEZ359I, BstHPI, MwhI, SsrI, Uba1408II).