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5'...R G#G W C C Y...3' 3'...Y C C W G#G R...5' L'enzima di restrizione Psp5II riconosce i siti RG^GWCCY e taglia a 37°C in 5-15 minuti usando il tampone universale FastDigest Buffer. Questo enzima è un isoschizomero di PpuMI avente la stessa specificità (Isoschizomeri: PspPPI).